1. اطلاعات ما نشان میدهد که شما عضو انجمن نیستید، لطفا برای استفاده کامل از انجمن ثبت نام کنید یا وارد انجمن شوید.
  2. 1- لطفا اول ایمیل تان .www نگذارید !
    2-بعد از ثبت نام,ایمیلی برای شما ارسال خواهد شد, که باید بر روی لینک داده شده کلیک نمایید تا اکانت شما فعال شود.

روش‌های شمارش باکتری‌ها

شروع موضوع توسط ! Justice ! ‏Nov 13, 2011 در انجمن تازه های علم پزشکی

  1. ! Justice !
    آنلاین

    ! Justice ! مدیر بخش ورزش هیات مدیره مدیر انجمن

    • دی شیخ با چراغ همی‌گشت گرد شهر کز دیو و دد ملولم و انسانم آرزوست
    تاریخ عضویت:
    ‏Feb 2, 2011
    ارسال ها:
    67,537
    تشکر شده:
    604
    امتیاز:
    83
    جنسیت:
    مرد
    به گزارش سایت یک پارس به نقل از تبیان توضیحاتی در مورد روش های شمارش باکتری ها ذکر شده که با هم قسمت هایی از این مطالب را میبینیم..

    شمارش باکتری‌ها






    پژهشگران عزیز در بسیاری از آزمایش‌های میکروبی باید بتوانیم تعداد باکتری‌ها را بشماریم. این شمارش می‌تواند در یک‌سان‌سازی دوز مصرفی باکتری یا مقایسه و سنجش اثر یک ماده بر شمار باکتری‌ها به کار برده شود. روش‌های گوناگونی برای شمارش باکتری‌ها به کار می‌رود که به هدف شمارش، امکانات موجود و مایع یا جامد بودن کشت باکتری بستگی دارد.

    روش تهیه‌ی رقت:



    ابتدایی‌ترین روش شمارش باکتری‌ها کشت دادن حجم خاصی از سوسپانسیون آن‌ها روی محیط کشت می‌باشد. در این روش حجم خاصی از سوسپانسیون باکتری روی محیط کشت جامد کشت داده می‌شود و پس از سپری‌شدن زمان لازم برای رشد باکتری، تعداد کلنی‌ها شمارش می‌شود (اگر این حجم خیلی کم باشد دقت کار پایین می‌آید). هر کلنی به توده‌ای از باکتری‌ها گفته می‌شود که در نتیجه‌ی رشد یک عدد باکتری اولیه روی محیط جامد ایجاد شده است.
    [​IMG]

    در شکل بالا کلنی‌های سفید و قرمز از دو سویه‌ی مخلتف باکتری اشریشیا کلی را می‌بینید.​

    بنابراین پس از رشد، می‌توان تعداد کلنی‌ها را برابر با تعداد باکتری‌ها در سوسپانسیون اولیه در نظر گرفت. ایراد این روش، فراگیر نبودن آن می‌باشد. زیرا در صورتی که تعداد باکتری‌ها خیلی زیاد باشد، آن‌ها تمام سطح پلیت را می‌پوشانند و تفکیک و شمارش تعداد کلنی‌ها ممکن نیست. از طرفی برخی میکروب‌ها ممکن است روی محیط جامد قابل کشت نباشند. اما با این حال هنوز این روش در بسیاری موارد کاربردی و مفید است. برای رفع اشکال فراوانی بیش از حد شمار باکتری‌ها (و در نتیجه به هم چسبیدن کلنی‌ها) از روش تهیه‌ی سریال رقت به ترتیب زیر استفاده می‌شود.
    1- 10 عدد لوله‌ی آزمایش دربسته حاوی 9 میلی‌لیتر آب مقطر یا سرم فیزیولوژی یا محیط کشت (بسته به نیاز) را استریل کنید. لوله‌ها را از 1 تا 10 شماره‌گذاری کنید و به ترتیب درون جا لوله‌ای قرار دهید.
    2- از نمونه‌ی اولیه که می‌خواهید باکتری‌های آن را بشمارید یک میلی‌لیتر در شرایط استریل (کنار شعله یا زیر هود) به لوله‌ی شماره‌ی 1 منتقل کنید.
    3- محتوای لوله‌ی اول را خوب مخلوط کنید تا رقت [SUP]1-[/SUP]10 شما کاملاً یک نواخت گردد. سپس از 1 میلی‌لیتر از آن را در شرایط استریل به لوله‌ی بعدی منتقل کنید.
    4- مرحله‌ی قبل را به ترتیب برای لوله‌های بعدی تکرار کنید تا رقت [SUP]10-[/SUP]10 به دست آید. در شکل زیر همین روند را مشاهده می‌کنید. هر چه رنگ کم‌رنگ‌تر می‌شود نشان‌دهنده‌ی رقیق‌تر شدن سوسپانسیون اولیه است.
    [​IMG]

    5- حال می‌توانید از تمام رقت‌ها هر کدام حجم معینی (مثلاً 1 میلی‌لیتر) را به یک پلیت محیط‌کشت جامد منتقل کنید و پس از سپری‌شدن زمان رشد، تعداد کلنی‌ها را بشمارید و بر رقت تقسیم کنید تا تعداد باکتری در حجم اولیه به دست آید.
    300عدد کلنی 1 میلی‌لیتر از رقت[SUP] 5-[/SUP]10
    مجهول 1 میلی‌لیتر از سوسپانسیون اولیه یا رقت 10[SUP]0[/SUP]
    [​IMG]

    6- از آن جا که به دلیل وجود خطا در انجام آزمایش ممکن است تعداد باکتری اولیه‌ی به دست آمده از هر رقت با دیگران برابر نباشد، داده‌های پرت را کنار بگذارید و از بقیه میانگین بگیرید.
    مثال:
    [​IMG]
    یکی از مهم‌ترین کاربردهای این روش در تعیین MIC‌ یا کم‌ترین غلظت مهارکننده‌ی رشد باکتری است که برای تعیین توانایی مهارکنندگی مواد ضدباکتری مانند آنتی‌بیوتیک‌هاست.

    اسپکتروفتومتری یا سنجش عبور نور:

    برای کار با این دستگاه باید باکتری در محیط کشت مایع باشد. این دستگاه شامل یک منبع نوری، یک شبکه‌ی پراش برای پخش کردن نور به طول‌موج‌های تشکیل‌دهنده، ویال‌های شفاف (از جنس پلاستیک، شیشه و کوارتز بسته به نوع مصرف) با توانایی عبور نور نزدیک به صددرصد و یک آشکارکننده‌ی شدت نور عبوری می‌باشد.
    [​IMG]

    در شکل شماتیک بالا اجزای یک استپکتروفتومتر را مشاهده می‌کنید.​


    برای سنجش مقدار سلول‌ها:


    مقدار مورد نیاز (معمولاً 1 تا 4 میلی‌لیتر) از سوسپانسیون باکتری‌‌ها در محیط کشت یا آب مقطر را در یک ویال شیشه‌ای می‌ریزیم. از مایع مورد استفاده در تهیه‌ی سوسپانسیون در ویال دیگری می‌ریزیم تا به عنوان شاهد استفاده شود. زیرا ممکن است درصدی از نور توسط ماده‌ی زمینه‌ای جذب شود.
    هر ماده‌ای طول‌موج ویژه‌ای را جذب می‌کند. بنابراین باید طول‌موج مخصوص به خودش را روی دستگاه تنظیم کرد.
    دستگاه با توجه به درصد نور عبوری و فرمول‌های محاسباتی که پیش‌تر در آن ذخیره شده است، عددی به ما می‌دهد که می‌توان با نمودارهای استاندارد مقایسه کرد و تعداد باکتری‌های موجود در واحد حجم را به دست آورد.
موضوعات مشابه با: روش‌های شمارش
انجمن عنوان تاریخ
تازه های علم پزشکی روش‌های طبیعی برای از بین بردن جوش‌های سرسیاه از صورت و بینی ‏Jul 14, 2014
تازه های علم پزشکی 6 نشانه استرس و روش‌های درمان آن ‏Dec 22, 2013
تازه های علم پزشکی اختلال‌های ناشی از گرما و روش‌های پیشگیری از آن‌ ‏Aug 6, 2013
تازه های علم پزشکی روش‌های از بین بردن بوی سیر از دهان ‏May 14, 2013
تازه های علم پزشکی محققان ایرانی دقت روش‌های تصویربرداری شناسایی سرطان را افزایش دادند ‏Mar 16, 2013
تازه های علم پزشکی روش‌های بسیار موثر در پاکسازی کبد و خون ‏Jun 14, 2012
تازه های علم پزشکی ارائه روش‌های درمانی جدید سرطان‌ها با استفاده از دانش پزشکی و هسته‌ای ‏May 14, 2012
تازه های علم پزشکی روش‌های ساده برای کاهش آمار مرگ نوزادان زودرس ‏May 6, 2012
تازه های علم پزشکی روش‌هایی براي سوزاندن چربي‌هاي اضافه ‏Oct 28, 2011